大鼠血清使用時(shí)都需要注意些什么？

　　大鼠血清來(lái)源于非免疫的大鼠宿主，用脂質(zhì)提取并用含有NaN3的PBS溶液透析以提高其透明度。建議用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配制5%-20%的工作液，直接滴在組織切片或細(xì)胞涂片上，37℃孵育10-30分鐘，取出血清無(wú)需洗滌，滴加適量稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。注意：封閉血清不能含有目的蛋白，與一抗不同。可以使用與二抗來(lái)源相同的封閉血清。
 
 

　　大鼠血清使用注意事項(xiàng)：

　　1、樣品中不能含有（NaN3），因?yàn)椋∟aN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。

　　2、樣品采集后應(yīng)盡快提取。提取應(yīng)根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如不能立即進(jìn)行試驗(yàn)，試樣可在-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

　　3、樣品應(yīng)充分離心，無(wú)溶血和顆粒。

　　4、實(shí)驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

　　5、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中，并用干燥劑保存。

　　6、建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和空白對(duì)照均一式兩份檢測(cè)，取平均值，以減少實(shí)驗(yàn)誤差。

　　7、記住樣品已經(jīng)稀釋了5倍，樣品的實(shí)際濃度是通過(guò)計(jì)算結(jié)果乘以5來(lái)計(jì)算的。

　　8、本試劑盒的定量范圍為11.25-360pg/ml。超出此范圍，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的延伸計(jì)算。這不是一個(gè)準(zhǔn)確的定量結(jié)果。請(qǐng)使用專用稀釋劑稀釋確定準(zhǔn)確結(jié)果（在11.25-360pg/ml范圍內(nèi)），再乘以總稀釋倍數(shù)即可得到樣品的最終濃度。

　　9、如果顏色太淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物孵育時(shí)間。

　　10、為避免交叉污染，每次添加標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和空白對(duì)照品時(shí)都應(yīng)更換吸頭；酶標(biāo)工作液、樣品稀釋液、底物等常用組分加懸臂，不得接觸微孔；請(qǐng)勿重復(fù)使用密封膜。

　　11、大鼠血清試劑盒應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用，不得混用不同批次的試劑。

　　12、基材B對(duì)光敏感，不宜長(zhǎng)時(shí)間暴露在光線下。